Cột sắc ký là kỹ thuật phổ thông nhất trong các phòng thí nghiệp,
phương pháp này rất đơn giản và có thể phân lập các hợp chất khỏi hỗn hợp một
cách nhanh chóng. Tuy nhiên, giống như nhiều kỹ thuật hóa học thực hành khác, để
có thể thiết lập và chạy một cột sắc ký nhanh và hiệu quả lại cần đến nhiều năm
kinh nghiệm.
Lựa chọn hệ dung môi
Đây là lựa chọn khó nhất và cũng
quan trọng nhất. Trong mỗi phòng thí nghiệm hóa hữu cơ có rất nhiều dung môi để
lựa chọn.
Sắc ký cột, đặc biệt là sắc
ký cột nhanh, thường tiến hành với một hỗn hợp 2 dung môi được dùng làm
pha động: một dung môi phân cực và một dung môi không phân cực. Đôi khi có thể
dùng một dung môi duy nhất hoặc hỗn hợp 3 dung môi khác nhau.
Nhiều người tự xây dựng được những
hệ dung môi yêu thích và thường bắt đầu chạy với chúng, sau đó điều chỉnh tỷ lệ
nếu cần.
Các cột
sắc ký thường được dùng trong các phòng thí nghiệm vô cơ và hữu cơ để loại bỏ
các nguyên liệu không phản ứng ban đầu hoặc phân lập một sản phẩm mong muốn khỏi
các sản phẩm phụ sau khi phản ứng hoàn thành. Để làm được điều này, hỗn hợp phản
ứng được đi qua một ống thủy tinh thẳng đứng, bên trong có nhồi hạt silica hoặc
alumina, các chất đi ra được thu lại thành từng phần nhỏ hay phân đoạn nhỏ ở đầu
dưới của cột. Các thành phần khác nhau của mẫu được phân tách thành các loại hợp
chất khác nhau do tương tác của hỗn hợp với silica.
Mức lưu giữ
Mức lưu giữ của một chất thường khác nhau đáng kể giữa các
thí nghiệm và phòng thí nghiệm do dao động của chất chiết xuất, pha tĩnh, nhiệt
độ và thiết kế của thí nghiệm. Vì vậy điều quan trọng là phải so sánh mức lưu
giữ của hợp chất muốn khảo sát với một hoặc nhiều hợp chất chuẩn trong cùng điều
kiện
Comments[ 0 ]
Đăng nhận xét